STERILISASI DAN PEMBUATAN MEDIA NA

    PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DASAR

STERILISASI DAN PEMBUATAN MEDIA NA

NAMA            : KRMALA RIZKI

NIM                : J1A116043

KELOMPOK : 3 (TIGA)

SHIFT             : 1

ASISTEN       :Haryati S.Si

 

                                                                                                                      

Nilai laporan  :

Tanggal terima laporan  :  Paraf asisten                   :

JURUSAN TEKNOLOGI HASIL PERTANIAN

FAKULTAS PERTANIAN

UNIVERSITAS JAMBI

2017

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

            Mikroorganisme dapat berkembang biak dengan alami atau dengan bantuan manusia.Mikroorganisme yang dikembangan oleh manusia diantaranya memlalui subtrat yang disebut media,pada saat melakukan pembuatan media hal yang harus diperhatikan ialah berkerja secara aseptis.Bekerja secara aseptis bisa  meliputi sterilisasi, jadi saat pembuatan ,media dilakukan  alat-alat yang akan digunakan harus disterilisasi sebelum di inokulasi.Sterilisasi yaitu suatu proses untuk mematikan semua organisme dan menyingkirkan mikroorganisme.Metode yang umumkan diterapkan untuk mensterilisasi media dan alat-alat ialah dengan pemanasan. Jika panas digunakan secara bersama-sama  dengan uap air disebut sterilisasi basah (menggunakan autoklaf),sedangkan jika tanpa uap air disebut sterilisasi lering (menggunakan oven).

            Medium  merupakan  bahan  yang  digunakan  untuk membunuh mikroorganisme diatas atau didalamnya.Sebelum menumbuhkan mikroorganisme, pertama-tama kita harus memahami kebutuhan dasarnya lalu mencoba memformulasikan suatu medium yang memberikan hasil baik.   

            Dalam praktikum ini kita mengetahui bagaimana cara suatu medium itu dibuat  agar dapat mengembangbiakan mikroorganisme dengan baik.juga bagaimana untuk menjadi medium pengembangbiakan itu steril atau bebas dari segaka mikroba baik patogen maupun tidak(Indan 2003).

1.2  Maksud dan Tujuan

1)      Mengenal persiapan  dan pengerjaan teknik sterilisasi alat, bahan dan area kerja untuk pengerjaan mikrobiologi secara aseptis.

2)      Mengetahuai prosedur pembuatan Medium tumbuh bakteri.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

            Mikroorganisme yang ingin kita tumbuhkan,yang pertama harus dilakukan adalah memahami kebutuhan dasarnya kemudian memformulasikan suatu medium atau bahan yang akan digunakan .Air sangat penting bagi organisme bersel tunggal sebagai komponen  utama protoplasmanya serta masuknya nutrien kedalam sel.pembuatan medium sebaiknya menggunakan air suling .Air sudah umum mengandung ion kalsium dan mgnesium yang tinggi.pada medium yang mengandung pepton dan ekstrak daging, air denga kualitas air sudah dapat menyebabkan terbentuknya endapan fosfat dan magnesium fosfat.(Hadieono 1993).

            Sterilisasi didesain untuk membunuh atau mengjhilangkan mikroorganisme.target suatu metode inaktvari tergantung dari metode dan tipe mikroorganismenya,yaitu tergantung dari asam nukleat,protein atau membrane mikroorganisme tersebut .agen kimia untuk steriisasi di sebut sterilant (pratiwi,2008).

            Nutrien Agar adalah medium umum untuk uji air dan produk dairy . NA juga digunakan untuk pertumbuhan mayoritas dan mikroorganisme yang tidak selektif, dalam artian mikrooorganisme heterotof .Media ini merupakan media sederhana yang dibbuat dari ekstrak beef,pepton dan agar. NA merupakan salah satu media yang umum digunakan prosedur bakteriologi sepeti uji bisa dari air ,sewage ,produk pangan untuk membawa stok kultur,untuk mepertumbuhan  sampel pada uji bakteri,dan mengisolasi organisme dala kultur murni dengan cara disterilisasi dengan autoclaf pada 12 C selama 15 menit (Fathir,2009).

            NA(Nutrien Agar ) adalah medium yang digunakan sebagai media oertumbuhan bakteri. NA dibuat dengan komposisi agar-agar yang sudah dipadatkan sehingga NA juga bisa disebut sebagai nutrisi padat yang digunakan untuk membunuhkan bakjteri.Fungsi agar-agar hanya sebagai pengental namun bukan zat makanan pada bakteri, agar dapat mudah menjadi padat pda suhu tertetu.Medium Nutrient Agar adalah salah satu medium padat yang memiliki komposisi yaitu agar-agar yang telah dipanaskan dan mencair dengan suhu 95 C (Sandra, 2013).

            Menurut Agus(1994) Strerilisasi adalah aetiap proses (kimia atau fisik)yang membunuh semua betuk hidup terutama mikroorganisme.Sedangkan menurut Indah (2003),steril ( Suci Hama ) artinya bebabas dari segala mikroba baik dari patogen maupun tidak.tindakan untuk membuat  membuat suatu benda menjadi steril di sebut sterilisasi.Adapun cara-cara Sterilisasi sebagi berikut: pembersihan, Sinar Matahari,Sinar Ultraviolet,Sinr-X dan Sinar Gamma, pendinginan, Pemanasan

BAB III

METODOLOGI

3.1  Waktu dan Tempat

Waktu : 11 April 2017

Tempat: Laboratorium  Biologi Unja Pondok Meja.

3.2  Bahan dan Alat

            Adapun alat dan bahanyang diperlukan selama proses praktikum Sterilisasi dan pembuatan Medium ini, dengan pralatan yang digunakan antara lain:

12 Erlenmayer 250 ml,10 erlenmayer 500 ml.

1.      3 Batang pengaduk.

2.      40 tabung reaksi

3.      3 rak tabung reaksi.

4.      50 Cawan Petri

5.      Autoklaf

6.      Oven

7.      Pemanas listrik/hot plat stirrer

8.      3 Pipet volumetrik

9.      Bunsen.

10.  Botol semprot alkohol.

            Sedangkan bahan yang diperlukan antara lain :

1.      NA  (Nutrient Agar)

2.      Aquades

3.      Kapas

4.      Alumunium foil

5.      Plastik wrap

6.      Kertas pembungkus

7.      tissue

8.      Kertas label

9.      Alkohol 70 %,

10.  Spirtus

3.3  Skema Kerja

    Pembuatan Media NA (Nutrient Agar)

1.      Timbang media NA sesuai  prosedur dikemasan.(catatan: buatkah 250 ml media NA untuk setiap shif praktikum).Penimbangan media dilakukan secara teliti da cepat,kemudian serbuk media dimasukkan secara hati-hati kedalam erlenmayer.

2.      Tambahkan aquades dan aduk sampai merata dengan batang pengaduk.

3.      Panaskan dengan hati-hatidengan penangas/ellemen pemanas sampai media tercampur homogen(ditunjukan dengan warna kuning  jernih). Perhatian : sewaktu pemanasan jangan sampai terbentuk buih berlebihan dan meluap!

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1   Data pengamatan dan Analisa Hasil

     

Aquades 250 ml                   NA 15 gr                            Aqudes dan NA

  

Pemanasan menggunakan    NA berubah menjadi jernih

auto klaf

4.2  Pembahasan

            Pada praktikum kali ini kita membahas tentang  Sterilisasi dan Pembuatan Media.NA (Nutrien agar) digunakan sebagai media pertumbuhan bakteri. Pembuatan medium percobaan ini dengan menggunakan NA (Nutrien Agar), dimana dalam pembuatannya terlebih dahulu dengan cara menimbang bahan yang akan digunakan sesuai dengan jumlah yang diperlukan. kemudian memasukkan bahan kedalam Erlenmeyer 250 ml,  dan diaduk menggunakan  magnetik stirer, tujuan dari pemanasan dan pengadukan ini adalah untuk menghomogenkan NA dengan aquades, dimana dengan pemanasan dapat mempercepat pelarutan dari Na dan Aqaudes. Setelah dipanaskan beberapa menit larutan berubah warna dari keruh menjadi kuning kecoklatan hal ini menandakan larutan telah homogen. Sewaktu pemanasan jangan sampai terbentuk buih berlebihan sampai meluap Kemudian  dimasukkan kedalam autoklav dengan suhu 120°C dengan mulut Erlenmeyer disumbat dengan kapas  ditutup dengan alumunium foil dan dibalut dengan plastik warp . Tujuan dari penutupan ini agar meminimalkan kontaminasi.

BAB V

PENUTUP

5.1 Kesimpulan

1.      Semua alat dan bahan yang digunakan pada praktikum harus disterilkan.Sterilisasi dilakukan bertujuan untuk menghindari kontaminasi,yaitu masuknya mikroorganisme yang tidak diinginkan.

2.       NA(Nutrient Agar)digunakan sebagai media pertumbuhan bakteri. untuk fermentasi.

3.      Pada saat menggunakan hot plate pemanasan jangan sampai terbentuk buih berlebihan sampai meluap.

4.      Larutan yang telah homogen ditunjukan dengan warna kuning agak jernih

5.       Pada saat menggunakan auto klaf diatur suhu 120°C selama 15 menit.

5.2 Saran

            Semua alat dan bahan yang akan digunakan dalam praktikum harus steril.Kebersihan pada praktikan harus dijaga.Dalam melakukan praktikum harus hati hati dan cepat.

DAFTAR PUSTAKA

Agus.M.1994.Mirobiologi Dasar.Gramedia:Jakarta

Fathur.2009.Mikrobiologi :Pembuatab medium .Erlangga : Jakarta

Handioetomo,R.1993Teknik ProsedurDasar LaboratoriumMikrobiologi ,Gramedia:Jakarta

Pratiwi,Sylvia.2008.mikrobiologi farmasi. Jakarta:Erlangga

Sandra,2003,Mikrobiologi umum,Erlangga: Jakarta